Füllvolumen ist nicht dieselbe Zahl wie Arbeitsvolumen

Letztes Frühjahr rief mich ein QC-Labor mit flüchtigen EPA 8260-Fläschchen wegen einer fehlerhaften Sequenz an. Ihre 2-ml-Fläschchen wurden gefüllt10 µLIn 200-µL-Pool zog der Autosampler, und durch Injektion 40 war die interne Standardreaktion gesunken18%Unterhalb der Kalibrierungskurve Nichts war falsch mit dem Instrument Die Durchstechflasche war für die Probe dimensioniert, nicht für die Injektionszahl, und das Septum war so oft durchstochen worden, dass das Loch zwischen den Ziehungen nicht mehr wieder verschlossen warDas ist das ganze Problem in einem Satz: Kapazität der Marke aijiren und Punktionsdauer müssen vor dem ersten Lauf, nicht nach dem zwanzigsten, auf die Injektionszahl abgestimmt werden.

In diesem Leitfaden geht es um die Arithmetik Es wird davon ausgegangen, dass Sie bereits wissen, was die Aijiren-Linie ist und in etwa welche dimensionale Familie zu Ihrem Autosampler passt Was es abdeckt, ist, wie Sie ein Füllvolumen, ein Restvolumen, eine Nadelstärke und eine Septumqualität auswählen, damit die Durchstechflasche jede Injektion, die Sie daraus zu nehmen planen, mit Rand überlebt Die1,0 bis 1,4 mlKatalog druckt Kapazitäts- und Septumdaten auf die Box; Die Aufgabe hier besteht darin, diese Zahlen in eine Entscheidung umzuwandeln.

Spritzenfilter vs. Filterfläschchen: Ein praktischer Leitfaden zur Probenklärung für HPLC Bei der HPLC- und UHPLC-Analyse wirkt sich die Klarheit der Proben direkt auf die Datengenauigkeit und Instrumentenstabilität aus.E-mail:Massenverlust nach 40 Einstichen Die 20 Gauge Nadel hatte ein Loch zu groß gemacht, als dass sich das Silikon schließen konnte Der Wechsel auf eine 23 Gauge Nadel und ein 1,5 mm Septum brachte den Massenverlust auf unter

Der Fehler, den ich am häufigsten sehe, ist das Füllen bis zur Schulter, weil der Analytiker "genug Probe" will Zwei Dinge gehen schief Erstens kann die Nadel, vor allem eine Nadel fester Höhe an einem Flüssigkeitshandler, mit dem Boden nach außen oder im Kegel sitzen und eine Luftschnecke ziehen Zweitens, wenn die Durchstechflasche verschlossen und das Septum bei einer so hohen Füllung durchstochen wird, kann der Flüssigkeitsspiegel in das Septum steigen und es benetzen Ein nasses Septum ist ein undichtes Septum.

Füllvolumen ist nicht die gleiche Anzahl wie Arbeitsvolumen - Aijiren-Durchstechflaschen für HPLC/GCNadellehre:Geplante Injektionen pro DurchstechflascheSeptumgrad:Für eine 1 µL Injektion, bei der die Nadel höher sitzt Die obere Schranke wird durch die Schulter, nicht durch die Krempe eingestellt Die untere Schranke wird durch Totvolumen gesetzt, das ist der nächste Abschnitt.

Aijiren Brand auf der aijirenvials.com

Totes Volumen ist die Flüssigkeit, die Sie nicht herausbekommen können Bei einer 12 × 32 mm Durchstechflasche mit 6 mm Hals und konischem Innenraum beträgt das Restvolumen typischerweise unterhalb der NadelspitzeReagenzflascheJe nachdem, wo die Nadel stoppt Wenn Sie 10 µL pro Injektion ziehen und Sie 1,2 ml in der Durchstechflasche haben, haben Sie 120 Injektionen von Flüssigkeit und etwa 100 Injektionen, bevor die Nadel anfängt, Luft zu ziehen Die Durchstechflasche weiß nicht, wie viele Injektionen Sie geplant haben Sie weiß nur, wie viel Flüssigkeit noch über der Spitze verbleibt.

Hier beginnt die Arithmetik der Injektionszahl Wenn Ihre Methode 10 µL pro Injektion einnimmt und Sie 50 Injektionen aus einer Durchstechflasche wünschen, benötigen Sie350 µL20 ml Headspace-DurchstechflascheReorder Point ist eine Varianzberechnung, keine Verbrauchsberechnung0,72 mmMindestfüllung Wenn Ihre Methode 100 µL pro Injektion einnimmt, benötigen 50 Injektionen 5 ml, die keine 2 ml Durchstechflasche aufnehmen kann Sie benötigen eine größere Durchstechflasche oder eine kleinere Injektion.

Das Punktionsleben ist eine Zählung, keine Behauptung

• Bei einer 11-mm-Bördelkappe auf einer 12 × 32-mm-Durchstechflasche sollte die Bördelung das Septum um ca. komprimieren
• AQL 1.0 auf kritischen Dimensionen, AQL 2.5 auf Kosmetik und nichts dazwischen0,72 mm
• Autosampler-Nadelbiegung: Ein routinemäßiger Fehler mit einer übersehenen Grundursache0,91 mm

Flüssigkeit, die einen Freiraum von etwa 0,7 ml hinterlässt Dieser Kopfraum ist nicht verschwendet Es ist der Puffer, der die Autosampler-Nadel Flüssigkeit erreichen lässt, ohne das Septum in die Probe zu ziehen.10 MalDer Besitz von Werkzeugen ist das Erste, was sich ändert, und es ist das Richtige für Käufer

Mikro-Einlage für Autosampler-Durchstechflaschen

Bewertet mit 100 bis 150 Einstichen Gut für Sequenzen bis 80 Injektionen Die zusätzliche Dicke kostet etwa 20% mehr pro Kappe und lohnt sich, wenn Sie versuchen, ein Re-Rack in der mittleren Sequenz zu vermeiden.Mindestfüllung (µL)Auf einer 22 Gauge Nadel unter sauberen Bedingungen Unter realen Bedingungen, mit einer 20 Gauge Nadel und einer Probe, die ein wenig Matrix enthält, würde ich ihr nicht trauen vorbei30 Mal.

Die Arithmetik, die zählt, ist folgende: Punktionen pro Durchstechflasche = Injektionen pro Durchstechflasche Wenn Sie 40 Injektionen aus einer Durchstechflasche nehmen, sieht das Septum 40 Punktionen, plus eine für jede Standardzugabe, plus eine für jedes Mal, wenn ein Analyst die Durchstechflasche erneut aufreißt Ein Lauf von 40 Injektionen mit zwei Standardzugaben und einem Re-Rack beträgt 43 Punktionen Das liegt innerhalb der 50-Punktionsbewertung, aber außerhalb meiner Komfortzone für eine 20-Gauge-Nadel.

Die Nadelstärke ändert die Arithmetik stärker, als die meisten Käufer erkennen. Eine 22-Gauge-Nadel hat einen Außendurchmesser von ca0,46 mmKopfraumfläschchen100 µLHeadspace-fläschchen150 µL. Die Einstichfläche skaliert mit dem Quadrat des Durchmessers, so dass ein 20 Gauge ein Loch macht etwa 60% größer als ein 22 Gauge Das größere Loch rettet sich langsamer wieder und leckt mehr zwischen den Injektionen Wenn Ihre Methode eine 22 oder 23 Gauge Nadel erlaubt, verwenden Sie es Die Einstichdauer verdoppelt sich ungefähr.

Prüfen Sie das Qualitätssystem, nicht den Ausstellungsraum

Bevor ich eine Methode auf 100 Injektionen auf eine Durchstechflasche beziehe, führe ich einen Wiederversiegelungstest durch. Füllen Sie drei Durchstechflaschen mit Ihrer Matrix, verschließen Sie sie mit dem Septum, das Sie verwenden möchten, und stechen Sie eine durch60 Mal1 µL±0,1 mm30 bis 40%Land:Mit der eigentlichen Nadel 15 Minuten bei Raumtemperatur sitzen lassen, dann jeweils auf einem Guthaben auf 0,1 mg wiegen Eine Durchstechflasche, die mehr als verloren hat1 mgMasse hat einen Leckweg Eine Durchstechflasche, die 5 mg oder mehr verloren hat, verschließt sich überhaupt nicht wieder Ich habe eine 20 Gauge Nadel an einem dünnen Silikonseptum verlieren sehenLaotisch20 ml Headspace-DurchstechflascheDie Grundlagen: Die Komponenten verstehen

Durchstechflasche Septa bei Durchstechflaschesepta.comName:und Kappenkombination mehr als das Septum allein Eine Kappe, die das Septum nicht gleichmäßig zusammendrückt, wird am Rand undicht, bevor es bei der Punktion undicht wird Die(englisch) bezeichnetWo das Siegel tatsächlich undicht ist: vier Wege, geordnet nach dem, was ich auf dem Feld sehe

Für eine 10-µL-Injektion × 50 Injektionen + 150 µL tot + 100 µL Rand =

Ich habe beobachtet, wie ein Käufer ein 100-Punktions-Septum spezifizierte und die Kappen dann mit einem billigen Crimper von Hand crimpte, der auf alles eingestellt war, was sich fest anfühlte Das Ergebnis war ein Leck am Kappenrand durch Injektion 15. Das Septum war in Ordnung Die Versiegelung war nicht.

20-ml-Durchstechflasche mit KopfraumWarum ein temperaturinduziertes Siegelversagen eine stille Quelle für GC-Datendrift istWeitere NeuigkeitenVon seiner Dicke Ein 1,0 mm Septum sollte unter dem Deckel bei 0,75 bis 0,80 mm landen Zu wenig Kompression und das Septum ist locker; zu viel und das Silikon ist vorgespannt und spaltet sich beim Einstich Ein Drehmomentschlüssel an einem Schraubverschluss ist leichter zu steuern als ein Handcrimper Bei 9 mm Schraubverschlüssen stelle ich das Drehmoment aufInjektionszahl:und alle 50 Kappen mit einem Drehmomentprüfer prüfen, bei 11 mm Crimpkappen überprüfe ich die Crimphöhe mit einem Bremssattel und lehne alles draußen abNachricht:.

Wenn Sie eine lange Sequenz ausführen und Sie die Kompression der Kappe nicht überprüfen, vermuten Sie die Lebensdauer der Punktion. Die Zahl auf dem Datenblatt geht von einer korrekt versiegelten Kappe aus. Die Anzahl, die Sie im Labor erhalten, hängt vom Crimper ab.

So bewerten Sie die Qualität von Chromatographie-Verbrauchsmaterialien für Lieferanten

Hier ist die Tabelle, die ich verwende, wenn ein Labor fragt, welches Aijiren-Format für eine bestimmte Injektionszahl gekauft werden soll. Die Zahlen gehen von einer 22-Gauge-Nadel, einer korrekt gekräuselten Kappe und einer Matrix aus, die nicht ungewöhnlich aggressiv ist.

Der Tisch ist kein Ersatz für einen Wiederversiegelungstest, aber er bringt Sie in das richtige Format, bevor Sie Geld ausgeben Die 10 µL × 100 Reihe ist die, die Menschen fängt Eine 2 ml Durchstechflasche kann keine 1.250 µL fassen und lässt trotzdem Kopfraum, daher ist die Antwort entweder eine größere Durchstechflasche oder zwei Durchstechflaschen mit jeweils 60 Injektionen Aufteilen des Laufs ist günstiger als der Kauf eines neuen Autosampler-Racks.

Feldfall: die 18%-Drift, die ein Füllproblem darstellte

Das Labor aus der Öffnung hatte eine 2 ml Aijiren-Durchstechflasche, eine 1,7 ml-Füllung und einen 200 µL-Ziehpool Der interne Standard fiel durch Injektion um 18% 40. Das erste, was ich überprüfte, war das Septum, und es war intakt Das zweite, was ich überprüfte, war der Füllstand, und es war das Problem Bei 1,7 ml befand sich die Flüssigkeit über der Schulter, und die Autosampler-Nadel zog aus einem Pool, der weniger als hatteFabrikRand über der Spitze durch Injektion 40. Die Nadel zog eine Mischung aus Flüssigkeit und Kopfraumdampf, was den internen Standard verdünnte.

Die Fixierung war kein neues Septum Es war eine 1,2 ml Füllung und ein Re-Rack bei 30 Injektionen Die Drift ging weg Die Lektion ist, dass ein Füllvolumen, das am Anfang einer Sequenz großzügig aussieht, am Ende zu einem Totvolumenproblem wird, und die Anzahl der Injektionen sagt Ihnen, wo das Ende ist.

1. Mechanismus der Bildung von Unterdruck in Probenfläschchen

Wenn die Zahl über der Schulterlinie Ihrer Durchstechflasche herauskommt, werden Sie sie nicht mit einer größeren Füllung lösen Sie benötigen ein anderes Fläschchenformat, oder Sie müssen den Lauf auf zwei Durchstechflaschen aufteilen DieLaotischAutosampler-Nadelbiegung: Ein routinemäßiger Ausfall mit einer übersehenen Wurzelursache. Gebogene Autosampler-Nadeln gehören zu den häufigsten und kostspieligsten mechanischen Ausfällen in HPLC- und GC-Labors.20 ml Headspace-DurchstechflascheFüllvolumen ist nicht dieselbe Anzahl wie Arbeitsvolumen

Dies ist der Teil der Punktionslebensdauer, den Ihnen das Datenblatt nicht sagt Die Bewertung gilt für eine Nadelstärke und eine Septumdicke Ändern Sie entweder eine und die Zahl bewegt sich Wenn Ihre Methode eine 20 Gauge Nadel verwendet, weil die Probe viskos ist, benötigen Sie ein dickeres Septum oder eine kürzere Sequenz, und Sie müssen dies in der Methode sagen.

Was die “Wahl einer Marke” für einen Verbrauchsmaterial-Käufer wirklich bedeutet

Es gibt drei Septum-Grade, die ich in der Aijiren-Linie sehe, und die richtige hängt davon ab, wie viele Einstiche Sie planen und wie lange die Durchstechflasche auf dem Autosampler sitzt.

• 10-425 breite SchraubfläschchenBewertet mit 50 bis 100 Einstichen auf einer 22 Gauge Nadel Gut für Sequenzen bis zu 40 Injektionen Die PTFE-Folie ist der Probe zugewandt und schützt sie vor dem Silikon Dies ist die Standardeinstellung für die meisten HPLC - und GC-Arbeiten.
• Premium Silikon/PTFE mit einer dickeren Silikonschicht:Jede 2 ml Autosampler Durchstechflasche, die ich abgemessen habe, fasst etwa 2,2 bis 2,4 ml bis zum Rand Die nützliche Zahl ist kleiner Eine Standard 12 × 32 mm Durchstechflasche mit einem 6 mm Hals und einer 40% Füllung hat ungefähr
• Chromatogarphie-instrumentWird verwendet, wenn die Probe mit Silikon reagiert oder wenn die Temperatur über 100 °C liegt Die Einstichdauer ist kürzer, typischerweise 30 bis 50, da sich die Schichten bei der Einstichstelle trennen Verwenden Sie diese nicht für lange Sequenzen, es sei denn, Sie haben sie getestet.

Temperatur ändert auch die Arithmetik Ein Septum bei 40 °C lässt sich langsamer wieder absetzen als eines bei 20 °C, und ein Headspace-Fläschchen bei 80 °C ist ein anderes Tier Wenn Ihre Methode die Durchstechflasche erhitzt, spalten Sie die Einstichdauer umWorkshop20 ml Headspace-DurchstechflascheWas “eine Marke wählen” für einen Verbrauchsmaterial-Käufer wirklich bedeutetThermo Fisher-Chromatographie und Probenhandhabung20-ml-Headspace-DurchstechflascheAutosampler-Nadelbiegung: Ein routinemäßiger Fehler mit einer übersehenen Ursache

Agilent Chromatographie Verbrauchsmaterialien und Säulen

Bevor eine Sequenz auf das Instrument kommt, führe ich diese Checkliste aus, es dauert fünf Minuten und es fängt die meisten von mir beschriebenen Ausfälle auf.

• Reseal-test:Mit einem Messzylinder auf drei Durchstechflaschen gemessen, nicht augenballenförmig Ziel ist 0,8 bis 1,4 ml für eine 2 ml Durchstechflasche, und die Oberseite der Flüssigkeit befindet sich unterhalb der Schulter.
• AufbewahrungsfläschchenDie Nadelspitze sitzt mindestens 2 mm über dem Boden der Durchstechflasche und das Restvolumen über der Spitze beträgt am Ende der Sequenz mindestens 150 µL.
• UnternehmensprofilInjektionen pro Durchstechflasche × Injektionsvolumen + Totvolumen + 100 µL Rand ist kleiner als das Füllvolumen Falls nicht, teilen Sie den Lauf auf.
• Tel/Whatsapp:Wenn irgendeine Linie versagt, ist die Fixierung normalerweise eine kleinere Füllung und ein Re-Rack, keine neue Durchstechflasche Die
• Startseite »20 ml Headspace-DurchstechflascheWarum Hochdruck-HPLC-Systeme einzigartige Risiken für die Integrität der Probenfläschchen schaffen
• Durchstechflasche mit Crimpung ND11Referenz hat eine gute Tabelle zum Septumverhalten bei Temperatur, wenn Sie die zugrunde liegenden Daten wünschen.
• PerkinElmer20-ml-Kopfraum-Durchstechflasche. Septa-Korierung verstehen: Was verursacht Partikelablagerungen während der Nadelpunktion

20-ml-Headspace-DurchstechflascheDer Wechselkontrolleintrag ist die lieferbare Lösung, nicht der RevalidierungslaufInsbesondere für Septen ist dieStellen Sie die Behälteranforderungen für flüchtige Stoffe ein, und die Füll- und Kopfraumzahlen in diesen Methoden sind der Boden und nicht die Decke. Ihre Methode kann enger sein.

Was ich einem Labor erzähle, das im Begriff ist, 10.000 Fläschchen zu kaufen

Rechnen Sie zuerst mit Ihrem Injektionsvolumen, Ihren geplanten Injektionen pro Durchstechflasche und Ihrem Totvolumen und geben Sie sie in die Formel Wenn die Anzahl über 1,4 ml für eine 2 ml Durchstechflasche liegt, kaufen Sie das falsche Format Wenn die Anzahl unter 0,8 ml liegt, verschwenden Sie Kapazität und sollten den Lauf auf mehr Durchstechflaschen aufteilen, nicht weniger.

Dann machen Sie den Wiederversiegelungstest an der eigentlichen Nadel und dem eigentlichen Septum Die Datenblatt-Punktionszahl ist ein Ausgangspunkt, keine Spezifikation Eine 22 Gauge Nadel an einem Standard-Silikon/PTFE Septum wird Ihnen 40 bis 50 zuverlässige Punktionen liefern Eine 20 Gauge Nadel an demselben Septum ergibt 20 bis 25. Der Unterschied ist nicht die Durchstechflasche Es ist die Nadel.

Für ein Labor, das 100 Injektionen pro Sequenz durchführt, sind die richtige Antwort normalerweise zwei Durchstechflaschen mit jeweils 50 Injektionen, eine 1,2-ml-Füllung, eine 22-Gauge-Nadel und ein Standardseptum. Diese Kombination ist günstig, wiederholbar und nicht abhängig von einer Datenblattnummer, die unter Bedingungen gemessen wurde, die Sie nie sehen werden. DieTotes Volumen und der 150 µL BodenChinesisch (vereinfacht)Aijiren Autosampler DurchstechflaschenBeide verfügen über nützliche Tabellen zur Nadel- und Septumkompatibilität, wenn Sie Ihre Arithmetik mit einer zweiten Quelle vergleichen möchten.

Die Entscheidungsregel lautet: Größe der Durchstechflasche so, dass das Füllvolumen mindestens dem Injektionsvolumen mal der Injektionszahl plus Totvolumen plus 100 µL entspricht, und Größe des Septums so, dass die Punktionszahl mindestens der Injektionszahl plus 20% Marge bei der tatsächlichen Nadelstärke und Temperatur entspricht Wenn diese beiden Zahlen nicht zu der Durchstechflasche passen, ändern Sie das Fläschchenformat oder teilen Sie den Lauf. Ändern Sie die Füllung nicht und hoffen Sie.

Durchstechflasche mit Reinigung und Falle/TOC-Probe

Verwandte Ressourcen aus unserem Labor-Verbrauchsmaterialnetzwerk:

• Referenzen & amp; weiterlesen
• 4 ml oder 10 ml VOA-Durchstechflasche
• Chinesisch (traditionell)
• Bimetall- oder Schichtsepten:

2 ml, auf 1,3 ml füllen, mit 60 teilen

• Die Grundlagen: Die Komponenten verstehen
• Thermo Fisher-Chromatographie und Probenhandhabung
• US EPA SW-846-Testmethoden für Abfälle und Materialien
• Beginnen Sie mit dem Instrument, nicht mit der Preisliste