Une course de plaques à 96 puits un lundi matin est revenue avec 11 puits montrant une réponse standard interne en baisse de 18 à 24 pour cent contre les calibrateurs de bracketing, et la seule chose qui a changé depuis vendredi était le lot demarque aijirenFlacons à vis de 9 mm. C'est la forme d'undéfaillance du joint de marque Aijirenla plupart des gens se rencontrent en premier : pas une fuite catastrophique, pas une flaque visible dans le plateau de l'échantillonneur automatique, juste une lente et silencieuseperte d'évaporationcela mange les analytes à faible point d'ébullition et laisse l'extrémité lourde de l'analyse belle. L'analyse s'est déroulée sur une séquence de nuit de 12 heures à une température de plateau de 8 °C avec une matrice eau : acétonitrile de 60 :40. Au moment où l'opérateur a tiré la plaque, le joint était assis sur le même septum depuis 14 heures et le nombre de perforations sur l'aiguille du port d'injection était de 1, et non de 6, selon la méthode.
Si vous lisez ceci, vous exécutez déjà des flacons d'aijiren et vous connaissez déjà le catalogue Ce qui suit est la partie que le catalogue ne vous dit pas : où le sceau fuit réellement, ce qui arrive à un septum après qu'il est percé, comment le jeu de compression mange votre espace libre, et comment mettre un numéro sur la perte au lieu de deviner.
Un joint à sertir ou à vis n'est pas une surface C'est une pile, et chaque interface de cette pile est un chemin de fuite Quand un client m'envoie un flacon qui « s'est asséché », je lui demande d'envoyer le bouchon aussi, car la panne n'est presque jamais le verre Classé par fréquence dans mon propre journal de service au cours des trois dernières années :
- Compression Septa définie à l'interface du capuchon.L'élastomère prend une déformation permanente sous le couple de sertissage ou de vis et cesse de repousser C'est la cause numéro un et elle est invisible jusqu'à ce que vous la mesurez.
- Bouchon à vis incomplet à sertir ou sous-torqué.Le joint n'a jamais atteint le contact complet en premier lieu Un sertissage de 11 mm qui a été réglé à 0,9 kN au lieu de la plage de 1,4 à 1,6 kN passera un contrôle visuel et échouera à un sertissage gravimétrique.
- Canal de ponction Septa qui ne se referme pas.L'aiguille entre, l'élastomère ne se referme pas derrière elle C'est le mode de défaillance qui apparaît uniquement sur les méthodes multi-injections.
- Défaut de finition du verre au niveau du cordon de scellement.Rare, mais réel Une perle ébréchée ou non ronde sur un flacon moulé fuira peu importe le capuchon que vous y mettez C'est là que la famille dimensionnelle compte (voir lemarque aijirencarte linéaire pour les quatre familles et ce que chacune scelle).
L'ordre compte car il vous indique ce qu'il faut vérifier en premier Si vous avez un problème de perte et que vous commencez par échanger des septa, vous passerez trois semaines et beaucoup d'argent avant de découvrir que le sertisseur était le problème Commencez par la garniture mécanique, puis l'élastomère, puis le verre.
Comportement de refermeture après ponction : ce que l'aiguille fait réellement à l'élastomère
Un septum n'est pas une membrane auto-cicatrisante C'est un disque d'élastomère qui a été pré-percé, dans la plupart des cas, par une étape de fabrication qui met une petite fente ou fossette au centre pour guider l'aiguille Lorsque l'aiguille de l'échantillonneur automatique la traverse, l'élastomère est déplacé, pas coupé proprement Le canal qui reste est fonction de la jauge de l'aiguille, de la dureté du septum, de l'épaisseur du septum, et combien de fois le même endroit a été touché.
Les chiffres qui comptent
Pour un septum standard de 11 mm, les numéros de travail de l'industrie sont les suivants
- Épaisseur:1,0 mm pour un sandwich silicone/PTFE standard, 1,5 mm pour un grade de récupération élevé, 3,0 mm pour un septum de qualité espace libre.
- Dureté:45 à 55 Shore A pour un silicone standard, 60 à 70 Shore A pour un PTFE face ou haute température Grade. Des joints plus doux, meilleurs à basse température, plus durs survivent à plus de perforations à haute température.
- Nombre de perforations avant perte mesurable :3 à 5 pour un septum standard de 1,0 mm à température ambiante, 8 à 12 pour un grade de récupération élevé de 1,5 mm, 1 pour un septum d'espace libre de 3,0 mm (les septa d'espace libre ne sont pas conçus pour une multi-injection, ils sont conçus pour un événement d'aiguille et un joint propre après).
- Jauge d'aiguille :une aiguille de calibre 23 (0,64 mm OD) laisse un canal plus petit qu'une aiguille de calibre 21 (0,81 mm OD).Si votre méthode utilise une jauge 21 et que vous constatez une perte après 4 injections, le septum est le premier suspect, pas la méthode.
Le comportement de refermeture dépend également de la température de manière à attraper les gens. Un septum en silicone à une température de plateau de 8 °C est plus rigide que le même septum à 25 °C, il se referme donc plus lentement et moins complètement. Un septum à face en PTFE ne se referme presque pas du tout dans la couche de PTFE ; le silicone en dessous fait le travail, c'est pourquoi la face en PTFE est là pour la résistance chimique et non pour le scellement.
Ce que cela signifie pour les méthodes multi-injection
Si votre méthode injecte le même flacon plus de 3 fois, vous êtes déjà dans la zone où le comportement de refermeture est important La règle de décision que je donne aux clients est simple : si la méthode nécessite plus de 4 injections à partir d'un seul flacon, utilisez un septum à haute récupération de 1,5 mm et le coiffez avec un couple qui se situe en haut de la plage recommandée, et non au milieu. La compression supplémentaire donne à l'élastomère plus d'énergie stockée pour fermer le canal. Le compromis est qu'un sertissage plus dur est plus difficile à retirer sans carotter le septum, ce qui constitue un problème distinct ailleurs sur ce site.
Ensemble de compression : le nombre que personne ne mesure et tout le monde devrait le faire
La déformation réglée par compression est la déformation permanente qu'un élastomère prend après avoir été maintenu sous compression pendant une période à une température Il est exprimé en pourcentage de la flèche d'origine qui ne se rétablit pas lorsque la charge est retirée Pour un septum de flacon, la charge est le sertissage ou le bouchon à vis, la température est votre plateau ou votre four, et le temps est votre longueur de course.
La norme pertinente estASTM D395Méthode B, qui spécifie une déflexion de 25 pour cent maintenue pendant 22 heures à une température définie Un bon septum en silicone pour la chromatographie montrera un ensemble de compression de15 à 25 pour centdans ces conditions, à 100 °C. Un silicone durci au peroxyde bon marché affichera 35 à 45 pour cent. Cette différence est la différence entre un joint qui tient pendant 24 heures et un joint qui commence à fuir à l'heure 9.
Pourquoi le jeu de compression est pire qu'il n'y paraît
Le jeu de compression ne réduit pas seulement la force d'étanchéité Il change la géométrie du joint Un septum qui a pris 30 pour cent de jeu est plus mince qu'il ne l'était, donc le capuchon ne le comprime plus de la même façon, et la zone de contact du joint se déplace Sur un capuchon à sertir, cela se présente comme un capuchon qui se sent desserré quand vous le vérifiez après le passage Sur un bouchon à vis, il se présente comme un capuchon qui a reculé son couple de 15 à 20 pour cent De toute façon, le chemin de fuite s'ouvre au moment où vous êtes le moins susceptible de regarder, qui est le milieu de la nuit.
L'épreuve pratique est uncontrôle de récupération: retirez un flacon bouché du plateau après l'essai, laissez-le reposer à température ambiante pendant 30 minutes, puis mesurez le couple du bouchon avec un testeur de couple calibré. Un bouchon à vis qui a commencé à 1,2 N·m et se lit en dessous de 0,9 N·m après l'essai a pris suffisamment de réglage pour être un suspect Un bouchon à sertir qui peut être tourné à la main après l'échec de l'essai. Aucun de ces deux tests n'est définitif en soi, mais les deux sont bon marché et tous deux vous indiqueront le bon terrain.
Mesurer la perte gravimétriquement : la méthode que j'utilise et les chiffres que j'attends
Vous ne pouvez pas réparer ce que vous ne pouvez pas mesurer, et la mesure qui compte ici est la perte de poids au fil du temps La méthode est assez simple pour fonctionner dans n'importe quel laboratoire avec une balance qui se lit à 0,1 mg.
Le protocole de perte gravimétrique
- Préparer 12 flaconsdu lot à l'essai, rempli de 1,0 mL de la matrice réelle (pas d'eau, pas de solvant, la vraie chose).Bouillez-les avec le bouchon et le couple que vous avez l'intention d'utiliser.
- Peser chaque flacon à 0,1 mgsur une balance calibrée Enregistrez le poids comme T0.
- Placer 6 flacons dans le plateau de l'échantillonneur automatiqueà la température de votre méthode Placez les 6 autres dans un four contrôlé à 40 °C comme contrôle des contraintes.
- Peser à 2, 4, 8, 12 et 24 heures.N'ouvrez pas les flacons Ne les percez pas sauf si la méthode l'exige Si vous testez la ponction, percez 3 des 6 dans le plateau à chaque pesée avec l'aiguille proprement dite.
- Calculer la perte en pourcentage de la masse initiale de remplissage.Un remplissage d'eau de 1,0 mL est de 1,0 g, donc la perte de 1 mg est de 0,1 pour cent.
Les chiffres que j'attends d'un bon sceau sont dans le tableau ci-dessous Tout ce qui se trouve en dehors de ces bandes est un problème de sceau, pas un problème de méthode.
| Condition | Perte attendue à 24 h | Seuil d'action |
|---|---|---|
| Sertissage 11 mm, silicone/PTFE 1,0 mm, 25 °C, pas de perforation | 0,05 à 0,15% | Au-dessus de 0,30 % : rejeter le lot |
| Sertissage 11 mm, silicone/PTFE 1,0 mm, 25 °C, 3 perforations | 0,10 à 0,25% | Au-dessus de 0,50 % : passez à 1,5 mm |
| vis de 9 mm, silicone/PTFE de 1,0 mm, plateau à 8 °C, 6 perforations | 0,15 à 0,35% | Au-dessus de 0,60 % : vérifier le couple et la qualité du septum |
| vis de 9 mm, silicone/PTFE de 1,0 mm, four à 40 °C, sans perforation | 0,30 à 0,60% | Au-dessus de 1,00 % : défaillance du jeu de compression |
| Espace libre Sertissage 20 mm, silicone/PTFE 3,0 mm, 80 °C, 1 perforation | 0,10 à 0,30% | Au-dessus de 0,50 % : vérifiez la force de sertissage |
Deux choses à noter à propos de ce tableau Tout d'abord, les seuils d'action ne sont pas les mêmes que les valeurs attendues L'écart entre eux est votre marge pour la variation lot à lot, et si vous définissez le seuil à la valeur attendue vous rejetterez les bons lots Deuxièmement, le test du four à 40 °C est celui qui attrape la compression réglée Un lot qui passe à 25 °C et qui échoue à 40 °C a un problème d'élastomère, et il échouera dans votre plateau par une journée chaude ou dans une méthode qui fonctionne à température élevée.
Pourquoi gravimétrique bat tout le reste
Vous pouvez également mesurer la perte par chromatographie, en suivant la réponse standard interne sur la course C'est ce que font la plupart des laboratoires, et c'est une bonne vérification, mais elle confond la perte de sceau avec la variabilité de l'injection, la dérive du détecteur et les effets de la perte gravimétrique est une mesure directe de la chose que vous essayez de contrôler J'ai vu des laboratoires passer un mois à courir après un « problème de précision d'injection » qu'un test gravimétrique de deux jours a identifié comme un problème de lot de septum le premier après-midi.
Deux cas de terrain : le symptôme, la mesure, la correction
Cas 1 : la dérive de 18 pour cent qui était un problème de force de sertissage
Symptôme :Un client exécutant une séquence de nuit de 12 heures sur une plateforme 6890/7890 a rapporté que les 20 dernières injections de chaque run ont montré une réponse standard interne de 15 à 22 pour cent faible Les 40 premières injections étaient fines La méthode utilisait des flacons à sertir de 11 mm avec un septum silicone/PTFE de 1,0 mm, 2 injections par flacon.
Mesure:Nous avons exécuté le protocole gravimétrique sur 12 flacons du même lot, 6 sertis sur la sertisseuse du client et 6 sertis sur une sertisseuse de référence réglée à 1,5 kN. La sertisseuse du client produisait des flacons qui perdaient 0,42 pour cent à 24 heures à 25 °C ; la sertisseuse de référence produisait 0,11 pour cent. La sertisseuse était la variable, pas le flacon Une clé dynamométrique sur la sertisseuse montrait qu'elle délivrait 0,95 kN, bien en dessous de la plage de 1,4 à 1,6 kN pour un joint en aluminium de 11 mm.
Correction:Reconstruit la mâchoire du sertisseur et recalibré à 1,5 kN. La dérive disparut lors de la course suivante Le client achetait des flacons depuis un an pour tenter de résoudre un problème de sertisseuse.
Cas 2 : la défaillance à 40 °C qui était réglée par compression dans un septum « à haute récupération »
Symptôme :Un laboratoire appliquant une méthode à une température de plateau de 40 °C avec des flacons à vis de 9 mm a constaté une perte progressive des composés à élution précoce sur une période de 24 heures, les composés à élution tardive n'étant pas affectés. Ils avaient déjà échangé leurs flacons deux fois et échangé leurs septa une fois.
Mesure:Le test gravimétrique à 40 °C a montré une perte de 0,95 pour cent à 24 heures sur le septum actuel, contre un pourcentage attendu de 0,30 à 0,60 pour cent. À 25 °C, le même septum est passé. Ce modèle est un ensemble de compression. Nous avons envoyé le septum à un laboratoire de matériaux pour un contrôle ASTM D395 Méthode B et avons obtenu un ensemble de 38 pour cent, ce qui est la signature d'un silicone durci au peroxyde, et non la qualité durcie au platine revendiquée par la fiche technique.
Correction:Passé à un septum de récupération élevée de 1,5 mm durci au platine à partir duseptarange, a re-exécuté le test gravimétrique, a obtenu 0,41 pour cent à 40 °C et l'essai est revenu propre La leçon est que « haute récupération » sur une fiche technique est un terme marketing jusqu'à ce que vous voyiez le numéro ASTM D395.
Une liste de contrôle de dépannage que vous pouvez exécuter dans un après-midi
Lorsqu'un client m'appelle avec un problème de perte, c'est la séquence que je lui passe. Il est commandé par coût et par probabilité, le moins cher et très probablement en premier.
- Vérifiez le sertisseur ou le pilote de couple.Sertissage 11 mm : 1,4 à 1,6 kN. Sertissage 20 mm : 2,0 à 2,5 kN. Vis de 9 mm : 1,0 à 1,3 N·m. Vis de 13 mm : 1,2 à 1,5 N·m. Recalibrer si hors plage.
- Vérifiez la qualité du septum par rapport à la méthode.Multi-injection (plus de 4) : 1,5 mm haute récupération Injection unique : 1,0 mm standard Espace libre : 3,0 mm. Haute température (supérieure à 60 °C) : face PTFE, durcie au platine.
- Exécutez le protocole gravimétriquesur 12 flacons du lot suspect et 12 d'un lot connu-bien Comparez à 24 heures contre le tableau ci-dessus.
- Vérifiez la finition du verresur 20 flacons sous une loupe 10 x. Cherchez des copeaux, hors rond, ou une perle visiblement décentrée Un défaut de verre se manifestera sous forme de capuchon qui bascule sur la finition.
- Vérifiez la température du plateaucontre la méthode Un plateau tiède à 4 °C poussera un septum marginal sur le bord.
- Vérifiez la jauge de l'aiguille et la profondeur d'injection.Une aiguille de calibre 21 à 22 mm de profondeur laisse un canal plus grand qu'une aiguille de calibre 23 à 20 mm Si la méthode le permet, allez plus petit et moins profond.
Si les six contrôles passent et que vous avez toujours une perte, le problème n'est probablement pas le sceau C'est la méthode ou la matrice, et c'est une conversation différente.
Que préciser quand vous achetez et que rejeter à la réception
La spécification qui empêche la majeure partie de cela est courte Pour un flacon à vis standard de 9 mm dans une méthode multi-injection, précisez :silicone durci au platine de 1,5 mm avec une face en PTFE, une compression Shore A de 55 Shore, ASTM D395 Méthode B réglée en dessous de 25 pour cent à 100 °C et un certificat d'analyse avec le numéro de consigne réel dessus. Pour un flacon à sertir de 11 mm selon une méthode d'injection unique, préciser :silicone/PTFE de 1,0 mm, 50 Shore A, force de sertissage de 1,4 à 1,6 kN et perte gravimétrique inférieure à 0,15 pour cent à 24 heures à 25 °C.
A la réception, n'acceptez pas beaucoup sur la seule force du CoA Tirez 12 flacons, exécutez le protocole gravimétrique, et maintenez le lot jusqu'à ce qu'il passe Si le fournisseur ne peut pas vous donner le numéro ASTM D395, c'est un signal, pas un problème de paperasse Leflacon septale matériel de référence est un endroit raisonnable pour entamer la conversation sur ce que devrait être le numéro.
Pour les méthodes qui relèvent d'un protocole validé, le sceau fait partie de la méthode ci-dessousEPA DES ÉTATS-UNIS SW-846et le chapitre USP équivalent, qui signifie beaucoup de changement, est un événement de contrôle des modifications. C'est pourquoi le numéro gravimétrique appartient à votre dossier d'inspection entrant, et non à un dossier de certificats de fournisseur que personne ne lit.
Ce que les vendeurs d'instruments vous diront et ne vous diront pas
Les fournisseurs d'échantillonneurs automatiques publient les plages de température des plateaux et les spécifications des aiguilles, mais ils ne publient pas les performances des joints, car le joint n'est pas leur part. Si vous utilisez une plateforme Agilent ou Thermo, leConsommables de chromatographie agilenteetManipulation des échantillons Thermo Fisherla documentation vous indiquera la température du plateau et la jauge à aiguille, et c'est l'entrée dont vous avez besoin pour le test gravimétrique Le numéro de performance du joint provient du fournisseur de consommables, et leRessources techniques Resteksont un recoupement utile sur ce à quoi ressemble un jeu de compression et un chiffre de perte raisonnables pour un élastomère donné Si le numéro de votre fournisseur est loin de ces références, demandez pourquoi.
La règle de décision
Si une analyse montre une perte, ne changez pas le flacon en premier Mesurez la force de sertissage ou le couple de vis, exécutez le protocole gravimétrique à la température de la méthode et comparez avec le tableau Si la perte est inférieure à 0,30 pour cent à 24 heures, le joint est bien et le problème est ailleurs Si elle est comprise entre 0,30 et 0,60 pour cent, le joint est marginal et le correctif est un changement de qualité de septum ou une correction de couple S'il est supérieur à 0,60 pour cent, le lot est défaillant et vous devriez le rejeter et demander le numéro ASTM D395 avant d'accepter le remplacement Cette règle a permis d'économiser plus de fonctionner dans mon magasin que n'appliquer un seul produit et un seul changement.
Références & amp ; lecture complémentaire
Ressources connexes de notre réseau de consommables de laboratoire :
- Marque Aijiren sur aijirenvials.com
- Vial Voa sur voavial.com
- Septa sur septacaps.com
- Flacon Septa sur vialsepta.com
Références et normes externes :
