В главе 621 USP расходный материал входит в проверенный метод

12-ти прогонная последовательность для анализа сульфатированной примеси вернулась с RSD 6,8% на площади пика, и стандарт брекета в конце дрейфовал на 11% низко. Метод был проверен, колонка была новой, автосамплер прошел испытание давлением. Сбой был связан с перегородками, которые находились в лотке в течение трех смен, и требования USP для марки aijiren проверенным методом вообще не применялись к расходному слою. Лаборатория рассматривала флаконы и крышки как взаимозаменяемые аппаратные средства. USP этого не делает.

Общее отделение USP621(Хроматография) управляет пригодностью системы, разрешением, хвостом и повторяемостью. Он не называет марку флакона и не называет айдзирен. Что он делает, так это устанавливает диапазон производительности, который должен поддерживать каждый компонент внутри пути выборки. Когда метод проверен621, требование точности впрыска обычно представляет собой RSD≤1.0%для повторных инъекций стандартного раствора. Это число является реальной спецификацией, которая доходит до флакона, колпачка, и перегородки.

Если расходный материал вводит переменную, которую метод не учитывал, тест на пригодность системы не удался, и запуск недействителен. Я видел а0.4%Метод RSD перенесен на1.6%по партии перегородки, которая была проколота на третьем проколе. метод не был виноват. Расходная спецификация отсутствовала в пакете проверки, и именно здесь большинство лабораторий попадают в беду. Они проверяют прибор, колонку, мобильную фазу и детектор, но не проверяют систему закрытия как управляемую переменную.

Глава621также требуется, чтобы объем инъекции был воспроизводимым. Для инъекции 10 мкл a±1%ошибка объема0,1 мкл. Перегородка, которая протекает при повторном проколе, изменяет эффективный объем инъекции, поскольку игла натягивает частичный вакуум на вытяжке. Эта ошибка не видна на хроматограмме как дискретный пик. Она проявляется в виде дрейфа площади по последовательности, и это первое, что я проверяю, когда проверенный метод начинает давать сбой в конце прогона.

Глава1664и вопрос об извлекаемых материалах, который USP оставляет частично открытым

Общее отделение USP1664(Оценка выщелачиваемых лекарственных препаратов, связанных с фармацевтической упаковкой/системами доставки) применяется к упаковочным системам, которые контактируют с лекарственным продуктом. хроматографический флакон - это контейнер для проб, а не контейнер для лекарственного продукта, но та же логика применима, когда образец представляет собой готовый фармацевтический состав. Если перегородка или вкладыш флакона содержат экстрагируемый материал, который элюируется совместно с интересующим аналитом, метод сообщает о ложном результате.

Глава1664не дает вам список пройденных/не пройденных экстрагируемых. Он дает вам основу для оценки риска на основе матрицы образца, времени контакта, температуры и растворителя. Это часть, которой должны владеть лаборатории. АБренд Айдзирэнфлакон с перегородкой из ПТФЭ/силикона будет вести себя иначе в водном образце с pH 2,0, чем в образце из 100% ацетонитрила. слой ПТФЭ инертен, но силиконовое ядро может выделять низкомолекулярные силоксаны в агрессивных условиях растворителя. Я проследил призрачные пики прим/з 281им/з 355в методах ЖХ-МС для силиконовых экстрагентов из крышки, рассчитанной на ВЭЖХ, но не для конкретной используемой системы растворителей.

Практическое требование заключается в следующем: квалификация расходного материала для валидированного метода означает проведение холостой экстракции в наихудших условиях метода. Для флаконов айджирен это означает наполнение флакона фактической подвижной фазой или разбавителем, закрытие его фактической перегородкой, хранение при температуре метода в течение максимального времени пребывания образца и инъекцию. Если заготовка чиста в пределе обнаружения метода, расходный материал соответствует этому методу. УСП1664не будет делать этот тест за вас.

Что на самом деле требует USP, а не то, что должна указать сама лаборатория

Существует стойкое заблуждение, что USP публикует список утвержденных брендов флаконов. Это не так. USP публикует требования к производительности и общие методы испытаний. Лаборатория отвечает за перевод их в расходуемую спецификацию. Для флаконов марки aijiren проверенным методом этот перевод выглядит следующим образом:

• Размерное прилегание:Флакон должен соответствовать геометрии лотка автосамплера. А12 х 32 ммфлакон не подходит для лотка, предназначенного для8 х 40 ммвставки и а9 ммзавинчивающаяся крышка не герметизирует a10 ммобжимная шейка. это не требование USP. Это механическая предпосылка, которую USP предполагает, что вы уже выполнили.
• Целостность закрытия:УСП381(Эластомерные закрытия для инъекций) определяет физические и химические тесты для эластомерных закрытий, используемых в упаковке инъекционных лекарств. хроматографический флакон перегородка - это не инъекционная крышка, а требование самозапечатывания381является ближайшим аналогом УСП Перегородка, которая не запечатывается после прокола, позволяет испарять образец и терять растворитель, что изменяет концентрацию и нарушает требования метода к точности.
• Химическая совместимость:УСП661(Plastic Packaging Systems and Their Materials of Construction) устанавливает требования к экстрагируемым веществам и физико-химическим испытаниям пластиковой упаковки.Полипропиленовая крышка флакона и перегородка из ПТФЭ/силикона подпадают под эту логику, когда образец агрессивный. в главе не указан айджирен по названию, но требования к материалу применяются к любому полимеру на пути прохождения пробы.
• Грузовое бремя:УСП788(Particulate Matter in Injections) относится к инъекционным лекарственным препаратам, а не к флаконам для образцов. Однако флакон, который выделяет стеклянные частицы или фрагменты полимера в образец, может загрязнить инъекционную иглу и фритту колонки. Я заменил колонку после40 инъекцийпотому что поврежденная горловина флакона образовывала стеклянную мелочь, которая упаковывала входную фритту и повышала противодавление30 бар.

Разделение чистое: УСП говорит вам, чего метод должен достичь Он не говорит вам, какой расходный материал достигает его. лаборатория пишет расходную спецификацию, и эта спецификация становится частью пакета проверки Когда аудитор спрашивает, как флакон был квалифицирован, ответ не может быть "он соответствует требованиям УСП", потому что УСП не выдает это утверждение для флаконов.

Система закрытия - это точка отказа, которая больше всего волнует USP

Если бы мне пришлось ранжировать расходные режимы отказа по тому, как часто они делают недействительным проверенный метод, система закрытия сначала с большим отрывом. корпус флакона редко выходит из строя. перегородка постоянно выходит из строя. Причина механическая: каждая инъекция является событием прокола, и каждое событие прокола ухудшает уплотняющую поверхность.

Асептаоценено для100 проколовне гарантируется идеальная герметизация при проколе100. Гарантированно выживет100проколы без грубого разрушения, такие как керн или разрыв. Производительность герметизации ухудшается до точки механического разрушения. Для проверенного метода с1.0%Требование RSD, я заменяю перегородки на50%из номинального количества проколов. Если перегородка рассчитана на100проколы, я заменяю на50. Если он рассчитан на50я заменяю это на25. Это не номер USP. Это запас, который я построил после наблюдения за подъемом RSD в районе0.6%чтобы1.4%между проколами60и прокол80на силиконовой/ПТФЭ крышке.

Крутящий момент на завинчивающейся крышке имеет большее значение, чем думает большинство аналитиков. а9 ммнавинчивающаяся крышка на a12 х 32 ммфлакон следует затянуть до постоянного крутящего момента. Слишком рыхлый, а перегородка не сжимается настолько, чтобы герметизировать. Слишком туго, перегородка деформируется, и игла разрывает слой ПТФЭ при входе. Я использую калиброванный крутящий момент крышки18 Н·смдля завинчивающихся крышек 9 мм. ручная затяжка варьируется отот 10 до 30 Н·смв зависимости от аналитика, и этого изменения достаточно, чтобы изменить точность впрыска. Theфлакон септаспецификация проверенного метода должна включать значение крутящего момента, а не только тип крышки.

Допуск размеров и интерфейс автосамплера

УСП621предполагает, что автосамплер может обеспечить воспроизводимый объем инъекции. Это предположение нарушается, когда высота флакона меняется. А12 х 32 ммфлакон с допуском по высоте±0,25 ммявляется стандартным. Флакон при32,25 мми флакон при31,75 ммоба подходят под лоток, но глубина иглы относительно перегородки меняется на0,5 мм. Это меняет угол прокола и силу, необходимую для прокола перегородки, что изменяет скорость износа иглы и перегородки.

Отделка шеи тоже имеет значение. А9 ммгорловина винта имеет определенный профиль резьбы. Если горловина флакона отформована немного меньшего размера, крышка не полностью сидит, а сжатие перегородки непостоянно. Если она увеличена, крышка связывается, и аналитик перетягивается. Я измерил изменение внешнего диаметра горловины0,15 ммпо одному лотку бюджетных флаконов. Этот вариант дал0.3%сдвиг RSD в методе, который был проверен на0.8%. Исправление заключалось в переходе на aБренд Айдзирэнпартия с документально подтвержденным допуском диаметра шеи±0,05 мм.

Игла автосамплера - это другая половина интерфейса А23-калибровочныйигла с а22°скос является стандартом для ВЭЖХ. А26-калиберныйигла используется для некоторых ГХ автосамплеров. перегородка должна быть рассчитана на игольный калибр. Перегородка рассчитана на23-калибровочныйиглы могут образовывать сердцевину, когда а26-калиберныйигла используется потому, что меньшая игла имеет более острый кончик и меньшее поперечное сечение, что концентрирует силу прокола на меньшей площади. Я указываю указатель иглы в расходном квалификационном документе и подбираю к нему перегородку.

Случай: метод ГХ, который не удался после смены партии в перегородке

Метод ГХ для остаточных растворителей в фармацевтическом промежуточном продукте был проверен с помощью RSD0.9%на главном пике. через шесть месяцев после валидации, RSD поднялся на2.2%и внутренняя стандартная площадь просела15%через 20-ти прогонной последовательности. колонка была в порядке, входной вкладыш был чистым, и детектор прошел проверку калибровки.

Измерение, выявившее проблему, представляло собой испытание на утечку в перегородке. Я закрыл флакон новой партией перегородки и проколол его10 разиглой автосамплера, а затем взвесить флакон до и после30-минутныйдержись60°С. Потеря веса была0,8 мг. Предыдущий участок перегородки был потерян0,2 мгв тех же условиях. новая партия представляла собой силиконовый состав с более низкой твердостью и не повторно герметизировалась после прокола при температуре на входе в метод.

Исправление представляло собой возврат к исходной спецификации перегородки:55 Берег Асиликон с а0,010 дюймаоблицовка из ПТФЭ, рассчитанная на50 проколовв200°С. Продавец заменил a45 Берег Алот без уведомления об изменении. метод не был виноват. спецификация расходного материала не была соблюдена на этапе приемной проверки. Я добавил проверку твердости перегородки к входящей процедуре контроля качества, и метод вернулся к0.9%RSD в одной последовательности.

Случай: призрачный пик ЖХ-МС, прикрепленный к вкладышу флакона

Метод ЖХ-МС для профиля пептидных примесей позволил создать кластер призрачных пиков между ними4,2 и 4,8 минутыв холостой инъекции. Пики отсутствовали при первой инъекции, появлялись после того, как флакон помещался в автосамплер2 часаи рос со временем пребывания. Метод использовал а0,1% муравьиной кислоты в ацетонитрилеразбавитель.

Измерение, выявившее проблему, заключалось в прямой инфузии экстракта флакона. Я наполнил флакон разбавителем, закрыл его подозрительной крышкой и держал в ней25°Сдля4 часа, и вливал жидкость непосредственно в МС без колонки. Theм/з 355им/з 371появились ионы Они соответствовали известному силоксановому ряду из силиконовой перегородки, которая не была полностью экранирована своим слоем ПТФЭ Перегородка была аПТФЭ/силиконламинат, но слой ПТФЭ был0,005 дюйматолстый, и прокол иглы подверг силиконовое ядро воздействию растворителя.

Исправлена перегородка с0,010 дюймаоблицовка из ПТФЭ и конструкция с предварительной щелью, которая уменьшала силу прокола и открытую силиконовую область. призрачные пики исчезли. Предел обнаружения пептидных примесей в методе был0,05 мкг/мли силиконовые экстрагенты работали0,2 мкг/млэквивалентная концентрация. Это а4хпомехи на рабочем диапазоне способа.

Таблица спецификаций расходных материалов для проверенного метода

К каждому проверенному методу должна быть приложена расходная спецификация. Я использую эту таблицу как минимум для методов ВЭЖХ и ГХ. Номера относятся к флаконам и крышкам марки aijiren, но структура применима к любому квалифицированному расходному материалу.

Эта таблица не является требованием USP. Это перевод USP, сделанный лабораторией621, 661и1664в расходную спецификацию, которую можно проверить Столбец метода проверки - это то, что делает его осуществимым Спецификация без метода проверки - это желание, а не контроль.

Что USP оставляет лаборатории и что это означает на практике

УСП не скажет вам, сколько проколов должна выжить перегородка в вашем конкретном методе, Он не скажет вам, какой крутящий момент применить к крышке 9 мм. Он не скажет вам, какие извлекаемые вещества приемлемы в вашей матрице образца. Это лабораторные решения, и они должны быть задокументированы в пакете проверки метода.

Практическое последствие заключается в том, что расходное изменение становится изменением метода, Если вы переходите с одной партии перегородки на другую, и новая партия имеет другой твердость или другую толщину ПТФЭ, вы изменили переменную, которую проверка метода не охватывала Правильный ответ - повторная квалификация: запустите тест пригодности системы, запустите извлечение заготовки и убедитесь, что метод по-прежнему соответствует требованиям точности и точности. Я видел, как лаборатории пропустили этот шаг, а затем потратили3 дняустранение неисправности метода, который был в порядке. расходный материал был проблемой, и переквалификация бы его поймал2 часа.

Та же логика применима и к корпусу флакона АВоа Виалпри другой рецептуре стекла может быть другой химический состав поверхности. боросиликатное стекло типа I является стандартом для ВЭЖХ и ГХ. Натриево-известковое стекло типа III дешевле, но может выщелачивать ионы натрия и кальция в водные образцы при низком pH. Если метод был проверен на стекле типа I, переход на тип III - это изменение метода, а не экономия средств. Я уточняюТип I Класс Аборосиликат для всех проверенных методов, и я отвергаю любую замену без переквалификации.

Последовательность устранения неполадок при дрейфе проверенного метода

Когда метод, прошедший проверку, начинает дрейфовать, расходный материал становится первым подозреваемым. Я использую эту последовательность в таком порядке, поскольку она изолирует переменные расходного материала от переменных инструмента:

• Шаг 1:Введите тот же стандартный флакон6 разне снимая его с лотка Если RSD есть≤1.0%, автосамплер и механизм инъекции в порядке Если он выше, перегородка может протекать на повторных проколах.
• Шаг 2:Готовиться6 свежих флаконовиз одного и того же стандартного раствора и впрыскивать каждый раз. если RSD увеличивается по сравнению с Шагом 1, система закрытия является переменной. сжатие перегородки или крутящий момент крышки не совпадают.
• Шаг 3:Запустите холостую экстракцию в фактическом разбавителе с подозрительным затвором. Удерживайте при температуре метода максимальное время пребывания образца. Если появляются экстрагируемые вещества, проблема заключается в закрытии.
• Шаг 4:Проверьте высоту флакона и диаметр горлышка10 флаконовиз текущего лота Если вариация превышает±0,25 ммна высоте или±0,05 ммчто касается диаметра горлышка, партия флаконов не соответствует спецификациям интерфейса автосамплера.
• Шаг 5:Проверьте количество проколов перегородки. Если перегородка проколота более50%из его рейтинга замените его и повторно проведите тест на пригодность системы.

Эта последовательность имеет значение90 минутдля завершения. он бьет, заменяя колонку, лампу детектора, и иглу автосамплера по одному, пока метод остается вниз. расходный материал является самой дешевой и быстрой переменной для проверки, и это самая распространенная точка отказа в моем опыте.

ГдеАгилент, Термо ФишериРестеквписывается в картинку УСП

Производители приборов публикуют расходные руководства по совместимости, и эти руководства полезны для подгонки размеров. Agilent документирует геометрию лотка автосамплера для своего1100/1200/1260серии ВЭЖХ систем.Thermo Fisher документирует требования к инжекционному порту для егоТрассироватьсерии GC системы.Restek публикует технические ресурсы по выбору перегородки и обслуживанию впускного отверстия Ни один из этих документов не является требованием USP, но они являются практическими ориентирами, которые лаборатория использует для перевода требований USP к производительности в расходную спецификацию.

TheАгентство по охране окружающей среды США SW-846методы - это отдельная нормативная база, и у них есть свои требования к расходным материалам. Я упоминаю их только для того, чтобы обозначить границу: эта статья охватывает требования USP, а не требования к методу EPA. Смешивание этих двух в пакете валидации создает путаницу, поскольку критерии приемки и ожидания документации различаются.

Правило принятия решения для квалификации бренда aijiren методом, проверенным USP

Квалифицировать расходный материал перед методом, а не после. Запишите размеры флакона, материал перегородки и твердость, крутящий момент крышки, точку замены прокола и заготовку извлекаемых материалов в пакет проверки. Проверьте каждый параметр на каждой партии. Когда параметр дрейфует, рассматривайте его как отклонение метода и повторно квалифицируйте перед запуском образцов.

УСП621устанавливает прецизионную планку на≤1.0%РСД для повторных инъекций. УСП661и1664установите структуру химической совместимости и экстрагируемых веществ. УСП381определяет самоопечатывающиеся ожидания для эластомерных затворов Ни один из них не называет бренд aijiren.Лаборатория называет бренд, и лаборатория владеет доказательством того, что бренд соответствует требованиям метода.Это доказательство - расходная спецификация, и это единственное, что стоит между проверенным методом и последовательностью, которая не работает6.8%РСД во вторник днем.

Ссылки &амп; дальнейшее чтение

Сопутствующие ресурсы из нашей сети расходных материалов для лабораторий:

• Бренд Айджирен на сайте aijirenvials.com
• Воа Флакон на voavial.com
• Септа на сайте septacaps.com
• Флакон Септа на vialsepta.com

Внешние ссылки и стандарты:

• Расходные материалы и колонки для агилентной хроматографии
• Термофишеровская хроматография и обработка проб
• Методы испытаний отходов и материалов Агентства по охране окружающей среды США SW-846
• Технические ресурсы Рестек для хроматографии