Name: Where the seal actually leaks: four paths, ranked by what I see in the field
Brand: Aijiren

20ml headspace flaconDe twee kolommen aijiren prints maar de meeste kopers vragen nooit naar

Een plaatrun met 96 putjes op maandagochtend kwam terug met 11 putjes die een interne standaardrespons lieten zien van 18 tot 24 procent ten opzichte van de tussen haakjes geplaatste kalibrators, en het enige dat sinds vrijdag was veranderd, was het lot vanaijiren brand9 mm schroef-top flacons Dat is de vorm van eenfalen van de merkzegel van Aijirende meeste mensen ontmoeten elkaar als eerste: geen catastrofaal lek, geen zichtbare plas in de autosamplerbak, alleen een langzame, stilleverdampingsverliesdat eet de laagkokende analyten op en laat het zware uiteinde van de run er prima uitzien. De run was een nachtelijke reeks van 12 uur bij een baktemperatuur van 8 °C met een water: acetonitrilmatrix van 60:40. Tegen de tijd dat de operator aan de plaat trok, zat de afdichting al 14 uur op hetzelfde septum en was het aantal puncties op de injectiepoortnaald 1, niet de 6 die de methode aannam.

Als je dit leest, dan loop je al aijiren flacons en ken je de catalogus al Wat volgt is het deel dat de catalogus je niet vertelt: waar de afdichting daadwerkelijk lekt, wat er met een septum gebeurt nadat het is doorboord, hoe compressie set je headspace opeet, en hoe je een nummer op het verlies zet in plaats van te raden.

Een krimp - of schroefafdichting is niet één oppervlak Het is een stapel, en elke interface in die stapel is een lekpad Wanneer een klant mij een flacon stuurt die "opdroogde", vraag ik hen om de dop ook te sturen, omdat de storing bijna nooit het glas is Gerangschikt naar frequentie in mijn eigen servicelogboek over de laatste drie jaar:

Septa-compressie ingesteld op het kapgrensvlak.Het elastomeer ondergaat een permanente vervorming onder het krimp - of schroefkoppel en stopt met terugduwen Dit is oorzaak nummer één en het is onzichtbaar totdat je het meet.
Onvolledige krimp- of onder-gekoppelde schroefdop.De afdichting heeft überhaupt nooit volledig contact bereikt. Een krimp van 11 mm die was ingesteld op 0,9 kN in plaats van het bereik van 1,4 tot 1,6 kN, zal een visuele controle doorstaan en een gravimetrische controle niet doorstaan.
Septapunctuurkanaal dat niet opnieuw afdicht.De naald gaat naar binnen, het elastomeer sluit er niet achter Dit is de faalmodus die alleen op multi-injectiemethoden verschijnt.
Glasafwerkingsdefect bij de afdichtingskraal.Zeldzaam, maar echt Een gechipte of niet-ronde kraal op een gegoten injectieflacon lekt, ongeacht welke dop u erop doet. Dit is waar de dimensionale familie ertoe doet (zie deaijiren brandlijnkaart voor de vier families en waartegen elke familie zich verzet).

De bestelling is belangrijk omdat het je vertelt wat je eerst moet controleren Als je een verlies probleem hebt en je begint met het verwisselen van septa, ben je drie weken en veel geld kwijt voordat je erachter komt dat de crimper het probleem was Begin met de mechanische afdichting, dan het elastomeer, dan het glas.

Herafdichtingsgedrag na punctie: wat de naald feitelijk met het elastomeer doet

Een septum is geen zelfherstellend membraan Het is een schijfje elastomeer dat vooraf is doorprikt, in de meeste gevallen, door een fabricagestap die een kleine spleet of kuiltje in het midden plaatst om de naald te geleiden, als de autosamplernaald er doorheen gaat wordt het elastomeer verplaatst, niet schoon gesneden, Het kanaal dat overblijft is een functie van naaldmeter, septumhardheid, septumdikte, en hoe vaak dezelfde plek is geraakt.

De cijfers die ertoe doen

Voor een standaard septum van 11 mm zijn de industrienummers

Dikte:1,0 mm voor een standaard sandwich van siliconen/PTFE, 1,5 mm voor een hoogherstelkwaliteit, 3,0 mm voor een tussenschot van kopruimtekwaliteit.
Hardheid:45 tot 55 Shore A voor een standaard siliconen, 60 tot 70 Shore A voor een PTFE-faced of hoge temperatuur rang Zachtere afdichtingen beter bij lage temperatuur, harder overleeft meer lekke banden bij hoge temperatuur.
Punctietelling vóór meetbaar verlies:3 tot 5 voor een standaard septum van 1,0 mm bij kamertemperatuur, 8 tot 12 voor een hoogherstelniveau van 1,5 mm, 1 voor een tussenschot van 3,0 mm (hoofdruimte-septa zijn niet ontworpen voor multi-injectie, ze zijn ontworpen voor één naaldgebeurtenis en een schone afdichting daarna).
Naaldmeter:een 23-gauge naald (0,64 mm OD) laat een kleiner kanaal achter dan een 21-gauge (0,81 mm OD) Als uw methode een 21-gauge gebruikt en u verlies ziet na 4 injecties, is het septum de eerste verdachte, niet de methode.

Het gedrag van het opnieuw afdichten is ook temperatuurafhankelijk op een manier die mensen eruit haalt. Een siliconen septum bij een baktemperatuur van 8 °C is stijver dan hetzelfde septum bij 25 °C, waardoor het langzamer en minder volledig opnieuw afdicht. Een septum met PTFE-vlak sluit bijna helemaal niet opnieuw af in de PTFE-laag; de siliconen eronder doen het werk, daarom is het PTFE-vlak er voor chemische bestendigheid, niet voor afdichting.

Wat dit betekent voor multi-injectiemethoden

Als uw methode dezelfde injectieflacon meer dan 3 keer injecteert, bevindt u zich al in de zone waar het gedrag van het opnieuw afdichten van belang is De beslissingsregel die ik klanten geef is eenvoudig: als de methode meer dan 4 injecties uit één enkele injectieflacon vereist, gebruik dan een septum met een hoge terugwinning van 1,5 mm en sluit dit af met een koppel dat zich bovenaan het aanbevolen bereik bevindt, niet in het midden. De extra compressie geeft het elastomeer meer opgeslagen energie om het kanaal te sluiten. De afweging is dat een hardere krimp moeilijker te verwijderen is zonder het septum te laten corromen, wat een afzonderlijk probleem is dat elders op deze locatie wordt beheerd.

Compressieset: het getal dat niemand meet en dat iedereen zou moeten doen

Compressie set is de permanente vervorming die een elastomeer ondergaat nadat het een periode onder druk is gehouden bij een temperatuur Het wordt uitgedrukt als een percentage van de oorspronkelijke doorbuiging dat niet herstelt wanneer de lading wordt verwijderd Voor een flacon septum is de lading de krimp of de schroefdop, de temperatuur is uw bakje of uw oven, en de tijd is uw run lengte.

De relevante norm isASTM D395Methode B, die een doorbuiging van 25 procent specificeert die gedurende 22 uur bij een ingestelde temperatuur wordt gehouden. Een goed siliconenseptum voor chromatografie zal een compressieset van tonen15 tot 25 procentonder die omstandigheden bij 100 °C. Een goedkope peroxide-uitgeharde siliconen zal 35 tot 45 procent laten zien Dat verschil is het verschil tussen een afdichting die 24 uur per dag blijft zitten en een die begint te lekken op uur 9.

Waarom compressie set slechter is dan het eruit ziet

Compressie set vermindert niet alleen de afdichtingskracht Het verandert de geometrie van de afdichting Een septum dat 30 procent set heeft genomen is dunner dan het was, dus de dop drukt het niet meer op dezelfde manier samen, en het contactgebied van de afdichting beweegt Op een krimpdop, dit verschijnt als een dop die los voelt als je het controleert na de run Op een schroefdop, het verschijnt als een dop die zijn koppel heeft teruggetrokken met 15 tot 20 procent Hoe dan ook, het lek pad opent zich op het moment dat je het minst waarschijnlijk om te kijken, dat is het midden van de nacht.

De praktijktest is eenherstelcontrole: haal een dopflacon van de bak na de run, laat deze 30 minuten op kamertemperatuur staan, meet dan het dopkoppel met een gekalibreerde torsiemeetapparaat Een schroefdop die begon bij 1,2 N·m en na de run onder de 0,9 N·m staat, heeft genoeg set nodig om een verdachte te zijn Een krimpdop die met de hand kan worden gedraaid nadat de run is mislukt Geen van beide is op zichzelf een definitieve test, maar beide zijn goedkoop en beide zullen je op de juiste partij wijzen.

Het verlies gravimetrisch meten: de methode die ik gebruik en de cijfers die ik verwacht

Je kunt niet repareren wat je niet kunt meten, en de meting die hier van belang is, is gewichtsverlies in de loop van de tijd. De methode is eenvoudig genoeg om in elk laboratorium uit te voeren met een balans die op 0,1 mg staat.

Het gravimetrische verliesprotocol

Bereid 12 injectieflacons voorvan de te testen partij, gevuld met 1,0 ml van de eigenlijke matrix (geen water, geen oplosmiddel, het echte werk) Dop ze af met de dop en het koppel dat u van plan bent te gebruiken.
Weeg elke injectieflacon tot 0,1 mgop een gekalibreerde balans Noteer het gewicht als T0.
Plaats 6 injectieflacons in de autosamplerladebij uw methode temperatuur Zet de andere 6 in een gecontroleerde oven op 40 °C als stresscontrole.
Weeg op 2, 4, 8, 12 en 24 uur.Open de injectieflacons niet Prik ze niet, tenzij de methode daarom vraagt Als u de punctie test, prik dan bij elke weging met de eigenlijke naald 3 van de 6 in de lade.
Bereken het verlies als percentage van de initiële vulmassa.Een watervulling van 1,0 ml is 1,0 g, dus 1 mg verlies is 0,1 procent.

De getallen die ik verwacht van een goede afdichting staan in onderstaande tabel Alles buiten deze banden is een seal probleem, geen methode probleem.

Conditie	Verwacht verlies bij 24 h	Actiedrempel
11 mm krimp, 1,0 mm siliconen/PTFE, 25 °C, geen punctie	0,05 tot 0,15%	Boven 0,30%: lot afwijzen
11 mm krimp, 1,0 mm siliconen/PTFE, 25 °C, 3 puncties	0,10 tot 0,25%	Boven 0,50%: overschakelen naar 1,5 mm
Schroef van 9 mm, siliconen/PTFE van 1,0 mm, bakje van 8 °C, 6 lekke banden	0,15 tot 0,35%	Boven 0,60%: controleer het koppel en de septumkwaliteit
Schroef van 9 mm, siliconen/PTFE van 1,0 mm, oven van 40 °C, geen punctie	0,30 tot 0,60%	Boven 1,00%: compressie set failure
Kopruimte 20 mm krimp, 3,0 mm siliconen/PTFE, 80 °C, 1 punctie	0,10 tot 0,30%	Boven 0,50%: controleer de krimpkracht

Twee dingen om op te merken over deze tabel Ten eerste zijn de actiedrempels niet hetzelfde als de verwachte waarden De kloof daartussen is uw marge voor lot-tot-lot variatie, en als u de drempel op de verwachte waarde instelt, wijst u goede partijen af Ten tweede is de oventest van 40 °C degene die compressie ingesteld wordt Een partij die bij 25 °C passeert en faalt bij 40 °C heeft een elastomeerprobleem, en het zal in uw bakje falen op een warme dag of bij een methode die op verhoogde temperatuur draait.

Waarom gravimetrisch al het andere verslaat

U kunt ook chromatografisch verlies meten, door de interne standaardrespons tijdens de run te volgen Dat is wat de meeste labs doen, en het is een goede controle, maar het combineert verlies van afdichting met injectievariabiliteit, detectordrift en matrixeffecten Gravimetrisch verlies is een directe meting van datgene wat u probeert te controleren Ik heb labs een maand lang een "injectieprecisieprobleem" zien najagen dat een tweedaagse gravimetrische test identificeerde als een septum lot probleem in de eerste middag.

Twee veldgevallen: het symptoom, de meting, de oplossing

Geval 1: de drift van 18 procent die een krimpkrachtprobleem was

Symptoom:Een klant die een 12 uur durende nachtelijke reeks op een 6890/7890 platform draaide, meldde dat de laatste 20 injecties van elke run een interne standaardrespons vertoonden van 15 tot 22 procent laag De eerste 40 injecties waren prima De methode maakte gebruik van 11 mm krimpflesjes met een 1,0 mm siliconen/PTFE septum, 2 injecties per injectieflacon.

Meting:We voerden het gravimetrische protocol uit op 12 injectieflacons van dezelfde partij, 6 gekrompen op de krimp van de klant en 6 gekrompen op een referentiekrimpset op 1,5 kN. De krimpfles van de klant produceerde injectieflacons die na 24 uur bij 25 °C 0,42 procent verloren; de referentiekrimp produceerde 0,11 procent. De krimp was variabel, niet de injectieflacon. Uit een momentsleutel op de krimp bleek dat deze 0,95 kN leverde, ruim onder het bereik van 1,4 tot 1,6 kN voor een aluminium afdichting van 11 mm.

Fix:De krimpkaak opnieuw opgebouwd en opnieuw gekalibreerd tot 1,5 kN. De drift verdween bij de volgende run. De klant kocht al een jaar flesjes om een krimpprobleem op te lossen.

Geval 2: de 40 °C-fout die compressie veroorzaakte in een "high-recovery" septum

Symptoom:Een laboratorium dat een methode bij een baktemperatuur van 40 °C uitvoerde met schroefflesjes van 9 mm zag een geleidelijk verlies van de vroeg eluerende verbindingen gedurende een periode van 24 uur, waarbij de laat-eluerende verbindingen onaangetast bleven. Ze hadden al twee keer van flesje gewisseld en één keer van septa gewisseld.

Meting:Gravimetrische test bij 40 °C toonde 0,95 procent verlies na 24 uur op het huidige septum, tegen een verwachte 0,30 tot 0,60 procent Bij 25 °C ging hetzelfde septum voorbij Dat patroon is compressie ingesteld We stuurden het septum naar een materiaallaboratorium voor een ASTM D395 Method B-controle en kregen een set van 38 procent, wat de handtekening is van een met peroxide uitgeharde siliconen, niet de met platina uitgeharde kwaliteit die het gegevensblad claimde.

Fix:Overgeschakeld naar een platina-uitgehard 1,5 mm hoogherstelseptum van deseptarange, hernam de gravimetrische test, kreeg 0,41 procent bij 40 °C, en de run kwam weer schoon De les is dat "high-recovery" op een gegevensblad een marketingterm is totdat je het ASTM D395-nummer ziet.

Een checklist voor probleemoplossing die u in een middag kunt uitvoeren

Wanneer een klant mij belt met een verliesprobleem, is dit de reeks waar ik ze doorheen loop. Het is gerangschikt op kosten en op waarschijnlijkheid, het goedkoopst en hoogstwaarschijnlijk eerst.

Check de crimper of torque driver.11 mm krimp: 1,4 tot 1,6 kN. 20 mm krimp: 2,0 tot 2,5 kN. 9 mm schroef: 1,0 tot 1,3 N·m. 13 mm schroef: 1,2 tot 1,5 N·m. Herkalibreren indien buiten bereik.
Controleer de septumgraad aan de hand van de methode.Multi-injectie (meer dan 4): 1,5 mm hoge terugwinning Enkele injectie: 1,0 mm standaard Kopruimte: 3,0 mm Hoge temperatuur (boven 60 °C): PTFE-gezicht, platina-uitgehard.
Voer het gravimetrische protocol uitop 12 flacons van de verdachte partij en 12 van een bekende-goede partij Vergelijk op 24 uur met de tabel hierboven.
Controleer de glasafwerkingop 20 flacons onder een 10x loep Zoek naar chips, out-of-round, of een kraal die zichtbaar off-center is Een glasdefect zal als een dop laten zien dat op de afwerking schommelt.
Controleer de traytemperatuurtegen de methode in Een bak die 4 °C warm loopt, duwt een marginaal septum over de rand.
Controleer de naaldmeter en de injectiediepte.Een 21-gauge naald op 22 mm diepte laat een groter kanaal achter dan een 23-gauge op 20 mm Als de methode het toelaat, ga dan kleiner en ondieper.

Als alle zes de controles voorbij gaan en je hebt nog steeds verlies, is het probleem waarschijnlijk niet de verzegeling. 't Is de methode of de matrix, en dat is een ander gesprek.

Wat u moet opgeven wanneer u koopt en wat u bij ontvangst moet weigeren

De specificatie die het meeste hiervan voorkomt is kort Voor een standaard 9 mm schroefflacon in een multi-injectiemethode specificeert u1,5 mm platina-uitgeharde siliconen met een PTFE-vlak, 55 Shore A, ASTM D395 Methode B compressie ingesteld onder de 25 procent bij 100 °C, en een analysecertificaat met het daadwerkelijke ingestelde nummer erop. Voor een krimpflacon van 11 mm bij een methode met één injectie, specificeer1,0 mm siliconen/PTFE, 50 Shore A, krimpkracht 1,4 tot 1,6 kN en een gravimetrisch verlies van minder dan 0,15 procent na 24 uur bij 25 °C.

Bij ontvangst, niet accepteren veel op de sterkte van de CoA alleen Trek 12 injectieflacons, voer het gravimetrische protocol, en houd de partij tot het voorbij is Als de leverancier u niet kan geven de ASTM D395 nummer, dat is een signaal, geen papierwerk probleem Deflacon septareferentiemateriaal is een redelijke plek om het gesprek te beginnen over wat het nummer moet zijn.

Voor methoden die onder een gevalideerd protocol vallen, maakt de verzegeling deel uit van de methode onderAMERIKAANSE EPA SW-846en het equivalente USP-hoofdstuk, wat veel verandering betekent, is een veranderingscontrolegebeurtenis. Daarom hoort het gravimetrische getal thuis in uw inkomende inspectierecord, niet in een map met leverancierscertificaten die niemand leest.

Wat de instrumentverkopers u wel en niet zullen vertellen

De autosampler leveranciers publiceren tray temperatuurbereiken en naald specificaties maar ze publiceren geen seal prestaties, omdat de seal niet hun deel is Als u een Agilent of Thermo platform draait, deHulpstoffen voor agilente chromatografieenThermo Fisher monsterbehandelingdocumentatie zal u de lade temperatuur en de naaldmeter vertellen, en dat is de input die u nodig hebt voor de gravimetrische test Het aantal prestaties van de afdichting komt van de leverancier van het verbruiksartikel, en deTechnische hulpmiddelen Restekzijn een handige kruiscontrole op hoe een redelijke compressie set en verlies cijfer eruit ziet voor een gegeven elastomeer Als het nummer van uw leverancier is ver van die referenties, vraag waarom.

De beslissingsregel

Als een run verlies vertoont, verander dan niet eerst de injectieflacon Meet de krimpkracht of het schroefkoppel, voer het gravimetrische protocol uit op de temperatuur van de methode en vergelijk het met de tabel Als het verlies na 24 uur minder dan 0,30 procent bedraagt, is de afdichting prima en is het probleem elders. Als het tussen 0,30 en 0,60 procent ligt, is de afdichting marginaal en is de oplossing een wijziging van septumkwaliteit of een koppelcorrectie. Als het boven de 0,60 procent ligt, mislukt de partij en moet u het afwijzen en om het ASTM D395-nummer vragen voordat u de vervanging accepteert. Die regel heeft meer runs in mijn winkel bespaard dan elke afzonderlijke productwissel en het kost één middag.